第27章 倒反天罡
一旁的莊小菲和林柔也愣住了。
她們倆對這些設備的認知基本停留在見過圖片、聽說過名字的層面上。有的甚至連聽都沒聽過。然而張沐晨居然不需要學長帶,直接上手操作?
在場所有人里,只有王曄表現的最淡定。
他站在操作台旁,雙手插兜。現在的他,哪怕是張沐晨撕開襯衣露出「S」標誌他都不奇怪。
晨哥就是個怪物。
遇事不決,晨哥解決。
這已經是王曄刻在骨子裡的認知。
作為死黨,他知道自己現在唯一要做的就是緊緊抱住張沐晨的大腿。等張沐晨開始大殺四方、瘋狂裝逼的時候,他在一旁比劃666就完事。
但是,韓野和蔣然這兩個碩士生沒有王曄這種覺悟。
短暫的錯愕後,兩個碩士的想法高度一致:這個本科生純粹是在裝逼。
一個臨床大三的,進實驗室連移液器都不一定摸過,上來就要自己操作立體定位儀和超聲吸引刀?
開什麼玩笑。
蔣然的餘光掃到林柔,隨即在心裡「哦」了一下。
明白了,原來是想在漂亮女孩面前顯擺,裝逼給自己加戲。
韓野也看到了,和蔣然對視了一眼。兩個人沒說一個字,但意思已經互相傳遞清楚:行啊,那就讓他顯擺,讓他裝吧。
立體定位儀和超聲吸引刀可不是吹吹牛逼就能上手的。光斑對焦差一個毫米打的就是腦幹,磨鑽的深度控制不好,顱骨鑽透了就是腦組織損傷。
到時候操作失敗別說裝逼了,說不定還得喊我們兩個學長幫忙。
想到這,韓野和蔣然各自皮笑肉不笑的往後退了一大步:「學弟,既然你這麼有把握,那我們兩個當師兄的也就不在這礙手礙腳了。你自己操作吧,我們就在旁邊看著。」
張沐晨點了帶你頭,走到立體定位儀前把耳杆和鼻夾重新校準到零點,然後退開半步:「王曄,小鼠。」
王曄趕緊把小鼠從籠子裡拿出來遞過去。
張沐晨接過被異氟烷麻醉的小鼠,固定頭部,調整鼻夾鬆緊,確認呼吸通暢。
韓野看著他的動作,眉頭一挑。
動作很標準,很麻利。該先調哪個旋鈕、後鎖哪個螺絲,都很精準。
張沐晨把立體定位儀的坐標調好,轉過身看向林柔和莊小菲:「你倆靠近,我教你們怎麼記錄坐標參數。」
林柔往前挪了兩步,翻開筆記本。莊小菲也湊過來,手裡握著筆。
「這是X軸,左右方向。中縫為零,左側為正,右側為負。」張沐晨的手指停在坐標尺的刻度上,「Bregma點校準之後,目標坐標是X:2.5,Y:-1.5。X是外側,Y是後方。」
「Y軸,前後方向。Bregma為零,前方為正,後方為負。我們的目標在Bregma後方1.5毫米。鎖死。」
王曄,莊小菲,林柔飛快記下。
「Z軸,深度。硬腦膜表面為零。雷射光栓的靶點在皮層,Z值在0.3到0.5之間,看小鼠的個體差異。先降到0.2,確認沒有觸碰硬腦膜,再往下。」張沐晨鬆開鎖止旋鈕,緩緩降下針尖。他一邊操作一邊報數。
「王曄,你來看針尖和顱骨表面的距離。從側面觀察,針尖剛接觸硬腦膜的時候,腦表面會有輕微的下壓。那個點就是Z軸零點。」
王曄彎腰,從側面看。
「看到下壓了嗎?」
「看到了。」
「好。退到負0.2,鎖死。」
韓野站在旁邊,眼睛瞪大。
張沐晨的這些操作他都很熟悉。但他做不到像張沐晨一樣,邊操作的同時還給旁邊三個人講清楚所有步驟的的坐標軸、方向、零點判據。
將按偏頭看了韓野一眼,韓野也在看他。
兩個人的眼神里同時浮現疑問:他怎麼可以這麼熟練?
像是做過幾百次的熟練感。
「王曄,你過來練。」張沐晨把小鼠從定位儀上取下來,退開半步,「先練固定。」
王曄點點頭,站到定位儀前。
張沐晨:「小鼠的頭部要固定在水平位,不能偏左,不能偏右。鼻夾鬆緊以不壓氣管為準。觀察腹部起伏,有節奏的呼吸,沒有憋氣,沒有吱吱叫。」
王曄按著,鬆了一點,又緊了一下。小鼠沒有掙扎。
「可以了。」張沐晨說。
王曄呼出一口氣。
「好,我現在演示開顱。顱骨鑽轉速調到20,000轉,生理鹽水持續滴注降溫。從Bregma點開始,先標記骨窗邊界。看到矢狀縫和中縫十字交叉點了嗎?那是Bregma。以它為原點,向右2.5毫米,向後1.5毫米,畫十字。」
鑽頭落下,骨屑飛濺,隨後被生理鹽水沖走。
張沐晨沿著標記線的邊緣走了一圈,骨片微微翹起。他用鑷子尖輕輕一挑,骨片脫離,硬腦膜暴露出來。銀白色,沒有破損,沒有出血。
「就這樣操作。」張沐晨偏頭看向林柔,「林柔,過來做接下來操作。」
林柔抿了下唇,走過來。
說實話,給小鼠開顱是一個很血腥的過程。雖然顱骨鑽磨骨的時候只有微量滲血,但骨頭磨開之後看到的景象是的硬腦膜和粉白色的血管搏動腦組織。
這種直面生命中樞的畫面對林柔的心理有著極大的衝擊。
作為大三本科生,林柔幾乎沒有接觸過這種實驗。但對於一個以後想要踏上神經領域的人來說,這是繞不過去的必修課。
要做到熟視無睹才算合格。
張沐晨把微量注射器遞給她:「尾靜脈注射玫瑰紅,劑量20毫克每公斤。然後雷射照射。輕度組30秒,中度組90秒,重度組180秒。損傷完成之後縫合頭皮,放回籠子。24小時後注射FITC-dextran,再過2小時灌流取材。」
林柔接過注射器,手指微微收緊。
「從尾尖三分之一處進針,針頭斜面朝上,角度小一點。見回血再推。」張沐晨指導道。
林柔深吸一口氣,針尖刺入皮膚。沒有回血。拔出來,重新找位置。第二次,暗紅色的血液順著針管回流了一點。她屏住呼吸,緩慢推注。藥液進入血管,沒有鼓起皮丘,也沒有阻力。
「可以。」張沐晨說。
林柔鬆開注射器。小鼠的眼睛、尾巴、爪子開始變成淡淡的粉紅色。這是光敏劑在全身循環的效果。
張沐晨把532nm雷射器拉到骨窗正上方,光斑對準Bregma後方1.5毫米、中縫外側2.5毫米的坐標點。
他偏頭看了林柔一眼:「繼續。」
林柔站到雷射器控制面板前。屏幕上跳動著三個預設程序:30秒、90秒、180秒。
「90秒?」她問。
「嗯。」
雷射啟動,綠色的光點落在硬腦膜上。90秒後,雷射自動關閉,硬腦膜上沒有焦痕,沒有出血。
一直在看著的韓野和蔣然知道,雷射激活了玫瑰紅產生活性氧,正在靶向損傷周細胞。
「'媽的,太牛逼了。」韓野和蔣然心裡暗嘆。
一個本科生對立體定位儀的熟悉程度不輸研三,調雷射器更是手拿把掐。
之前他們覺得張沐晨在裝逼,現在發現他不是在裝,他是真的會。
「莊小菲。」張沐晨喊了一聲。
「啊?」莊小菲抬頭。
「你負責記錄實驗數據。今天的日期、小鼠編號、分組、坐標參數、雷射功率、損傷時間,每台設備的運行參數。以後寫論文的時候這些數據缺一個都沒辦法回溯。」
莊小菲趕緊翻開筆記本,在第一行寫下日期:2008年10月......
張沐晨給小鼠縫合頭皮,完成後看了一眼牆上的掛鍾:「24小時後注射FITC-dextran。現在是下午三點。明天下午三點準時注射。」
張沐晨走到小鼠籠邊,把剛做完光栓的那隻小鼠放回去。小鼠蜷在籠角,鼻子輕輕抽動,鬍鬚一顫一顫的。
剛被開顱、被雷射照射、被縫合頭皮,但它活著。呼吸平穩。
「明天的注射是整個實驗最難的一環。」張沐晨看向幾個人,「小鼠注射過玫瑰紅,尾靜脈穿刺會造成局部炎症和微小血栓,光敏劑對血管壁也有刺激。所以小鼠的靜脈會紅腫、僵硬、管腔狹窄。第二次注射只能靠手感。」
「溫水浸泡或酒精擦拭可以讓血管擴張,但這個節段已經硬化了,擴張有限。所以進針角度要比平時大一點,穿透皮膚後稍微上挑就是進到管腔了。」
韓野和蔣然對視了一眼,眼神里是藏不住的驚嘆。
蔣然咽了口唾沫,開口提問道:「學弟,我以前做這一步的時候明明感覺針扎進去了,但一推藥,小鼠經常會出現劇烈的抽搐,幾秒鐘內就當場猝死,這是為什麼?」
張沐晨:「推得太快或者分子量計算錯誤。40kDa的FITC-dextran很黏稠,血管硬化後管腔狹窄。如果像注射普通生理鹽水那樣會導致小鼠腦部血液回流受阻,顱內壓暴增,誘發急性腦疝。所以標準做法是全程勻速慢推,控制在20到30秒。」
蔣然如認真的點點頭。
這時,韓野也緊湊了過來,虛心求教道:「學弟,FITC-dextran注射後循環多久灌流?不同分子量的時間不一樣,40kDa怎麼定?」
「30到60分鐘。40kDa介於4kDa和150kDa之間。時間短了滲漏面積不夠,時間長了背景太高。文獻上是30分鐘起,我們可以做到45分鐘。」
韓野點了點頭,在筆記本上寫下要點。
林柔和莊小菲也提了幾個問題,張沐晨都一一解答。
一時間,實驗室所有人都圍在張沐晨身邊。
這時,實驗室的門被推開,李芳然走進來。
一進屋,他就看到實驗台前圍的滿滿當當,自己的兩個碩士生躬著腰做筆記。
李芳然有些奇怪的走上前:「韓野,蔣然。你倆教得怎麼樣了?儀器設備都教明白了吧?」
韓野抬起頭看了張沐晨一眼,又看了一眼李芳然:「老師,學弟不用我們教。反而是學弟在教我們。」
李芳然:?
倒反天罡?
.....
她們倆對這些設備的認知基本停留在見過圖片、聽說過名字的層面上。有的甚至連聽都沒聽過。然而張沐晨居然不需要學長帶,直接上手操作?
在場所有人里,只有王曄表現的最淡定。
他站在操作台旁,雙手插兜。現在的他,哪怕是張沐晨撕開襯衣露出「S」標誌他都不奇怪。
晨哥就是個怪物。
遇事不決,晨哥解決。
這已經是王曄刻在骨子裡的認知。
作為死黨,他知道自己現在唯一要做的就是緊緊抱住張沐晨的大腿。等張沐晨開始大殺四方、瘋狂裝逼的時候,他在一旁比劃666就完事。
但是,韓野和蔣然這兩個碩士生沒有王曄這種覺悟。
短暫的錯愕後,兩個碩士的想法高度一致:這個本科生純粹是在裝逼。
一個臨床大三的,進實驗室連移液器都不一定摸過,上來就要自己操作立體定位儀和超聲吸引刀?
開什麼玩笑。
蔣然的餘光掃到林柔,隨即在心裡「哦」了一下。
明白了,原來是想在漂亮女孩面前顯擺,裝逼給自己加戲。
韓野也看到了,和蔣然對視了一眼。兩個人沒說一個字,但意思已經互相傳遞清楚:行啊,那就讓他顯擺,讓他裝吧。
立體定位儀和超聲吸引刀可不是吹吹牛逼就能上手的。光斑對焦差一個毫米打的就是腦幹,磨鑽的深度控制不好,顱骨鑽透了就是腦組織損傷。
到時候操作失敗別說裝逼了,說不定還得喊我們兩個學長幫忙。
想到這,韓野和蔣然各自皮笑肉不笑的往後退了一大步:「學弟,既然你這麼有把握,那我們兩個當師兄的也就不在這礙手礙腳了。你自己操作吧,我們就在旁邊看著。」
張沐晨點了帶你頭,走到立體定位儀前把耳杆和鼻夾重新校準到零點,然後退開半步:「王曄,小鼠。」
王曄趕緊把小鼠從籠子裡拿出來遞過去。
張沐晨接過被異氟烷麻醉的小鼠,固定頭部,調整鼻夾鬆緊,確認呼吸通暢。
韓野看著他的動作,眉頭一挑。
動作很標準,很麻利。該先調哪個旋鈕、後鎖哪個螺絲,都很精準。
張沐晨把立體定位儀的坐標調好,轉過身看向林柔和莊小菲:「你倆靠近,我教你們怎麼記錄坐標參數。」
林柔往前挪了兩步,翻開筆記本。莊小菲也湊過來,手裡握著筆。
「這是X軸,左右方向。中縫為零,左側為正,右側為負。」張沐晨的手指停在坐標尺的刻度上,「Bregma點校準之後,目標坐標是X:2.5,Y:-1.5。X是外側,Y是後方。」
「Y軸,前後方向。Bregma為零,前方為正,後方為負。我們的目標在Bregma後方1.5毫米。鎖死。」
王曄,莊小菲,林柔飛快記下。
「Z軸,深度。硬腦膜表面為零。雷射光栓的靶點在皮層,Z值在0.3到0.5之間,看小鼠的個體差異。先降到0.2,確認沒有觸碰硬腦膜,再往下。」張沐晨鬆開鎖止旋鈕,緩緩降下針尖。他一邊操作一邊報數。
「王曄,你來看針尖和顱骨表面的距離。從側面觀察,針尖剛接觸硬腦膜的時候,腦表面會有輕微的下壓。那個點就是Z軸零點。」
王曄彎腰,從側面看。
「看到下壓了嗎?」
「看到了。」
「好。退到負0.2,鎖死。」
韓野站在旁邊,眼睛瞪大。
張沐晨的這些操作他都很熟悉。但他做不到像張沐晨一樣,邊操作的同時還給旁邊三個人講清楚所有步驟的的坐標軸、方向、零點判據。
將按偏頭看了韓野一眼,韓野也在看他。
兩個人的眼神里同時浮現疑問:他怎麼可以這麼熟練?
像是做過幾百次的熟練感。
「王曄,你過來練。」張沐晨把小鼠從定位儀上取下來,退開半步,「先練固定。」
王曄點點頭,站到定位儀前。
張沐晨:「小鼠的頭部要固定在水平位,不能偏左,不能偏右。鼻夾鬆緊以不壓氣管為準。觀察腹部起伏,有節奏的呼吸,沒有憋氣,沒有吱吱叫。」
王曄按著,鬆了一點,又緊了一下。小鼠沒有掙扎。
「可以了。」張沐晨說。
王曄呼出一口氣。
「好,我現在演示開顱。顱骨鑽轉速調到20,000轉,生理鹽水持續滴注降溫。從Bregma點開始,先標記骨窗邊界。看到矢狀縫和中縫十字交叉點了嗎?那是Bregma。以它為原點,向右2.5毫米,向後1.5毫米,畫十字。」
鑽頭落下,骨屑飛濺,隨後被生理鹽水沖走。
張沐晨沿著標記線的邊緣走了一圈,骨片微微翹起。他用鑷子尖輕輕一挑,骨片脫離,硬腦膜暴露出來。銀白色,沒有破損,沒有出血。
「就這樣操作。」張沐晨偏頭看向林柔,「林柔,過來做接下來操作。」
林柔抿了下唇,走過來。
說實話,給小鼠開顱是一個很血腥的過程。雖然顱骨鑽磨骨的時候只有微量滲血,但骨頭磨開之後看到的景象是的硬腦膜和粉白色的血管搏動腦組織。
這種直面生命中樞的畫面對林柔的心理有著極大的衝擊。
作為大三本科生,林柔幾乎沒有接觸過這種實驗。但對於一個以後想要踏上神經領域的人來說,這是繞不過去的必修課。
要做到熟視無睹才算合格。
張沐晨把微量注射器遞給她:「尾靜脈注射玫瑰紅,劑量20毫克每公斤。然後雷射照射。輕度組30秒,中度組90秒,重度組180秒。損傷完成之後縫合頭皮,放回籠子。24小時後注射FITC-dextran,再過2小時灌流取材。」
林柔接過注射器,手指微微收緊。
「從尾尖三分之一處進針,針頭斜面朝上,角度小一點。見回血再推。」張沐晨指導道。
林柔深吸一口氣,針尖刺入皮膚。沒有回血。拔出來,重新找位置。第二次,暗紅色的血液順著針管回流了一點。她屏住呼吸,緩慢推注。藥液進入血管,沒有鼓起皮丘,也沒有阻力。
「可以。」張沐晨說。
林柔鬆開注射器。小鼠的眼睛、尾巴、爪子開始變成淡淡的粉紅色。這是光敏劑在全身循環的效果。
張沐晨把532nm雷射器拉到骨窗正上方,光斑對準Bregma後方1.5毫米、中縫外側2.5毫米的坐標點。
他偏頭看了林柔一眼:「繼續。」
林柔站到雷射器控制面板前。屏幕上跳動著三個預設程序:30秒、90秒、180秒。
「90秒?」她問。
「嗯。」
雷射啟動,綠色的光點落在硬腦膜上。90秒後,雷射自動關閉,硬腦膜上沒有焦痕,沒有出血。
一直在看著的韓野和蔣然知道,雷射激活了玫瑰紅產生活性氧,正在靶向損傷周細胞。
「'媽的,太牛逼了。」韓野和蔣然心裡暗嘆。
一個本科生對立體定位儀的熟悉程度不輸研三,調雷射器更是手拿把掐。
之前他們覺得張沐晨在裝逼,現在發現他不是在裝,他是真的會。
「莊小菲。」張沐晨喊了一聲。
「啊?」莊小菲抬頭。
「你負責記錄實驗數據。今天的日期、小鼠編號、分組、坐標參數、雷射功率、損傷時間,每台設備的運行參數。以後寫論文的時候這些數據缺一個都沒辦法回溯。」
莊小菲趕緊翻開筆記本,在第一行寫下日期:2008年10月......
張沐晨給小鼠縫合頭皮,完成後看了一眼牆上的掛鍾:「24小時後注射FITC-dextran。現在是下午三點。明天下午三點準時注射。」
張沐晨走到小鼠籠邊,把剛做完光栓的那隻小鼠放回去。小鼠蜷在籠角,鼻子輕輕抽動,鬍鬚一顫一顫的。
剛被開顱、被雷射照射、被縫合頭皮,但它活著。呼吸平穩。
「明天的注射是整個實驗最難的一環。」張沐晨看向幾個人,「小鼠注射過玫瑰紅,尾靜脈穿刺會造成局部炎症和微小血栓,光敏劑對血管壁也有刺激。所以小鼠的靜脈會紅腫、僵硬、管腔狹窄。第二次注射只能靠手感。」
「溫水浸泡或酒精擦拭可以讓血管擴張,但這個節段已經硬化了,擴張有限。所以進針角度要比平時大一點,穿透皮膚後稍微上挑就是進到管腔了。」
韓野和蔣然對視了一眼,眼神里是藏不住的驚嘆。
蔣然咽了口唾沫,開口提問道:「學弟,我以前做這一步的時候明明感覺針扎進去了,但一推藥,小鼠經常會出現劇烈的抽搐,幾秒鐘內就當場猝死,這是為什麼?」
張沐晨:「推得太快或者分子量計算錯誤。40kDa的FITC-dextran很黏稠,血管硬化後管腔狹窄。如果像注射普通生理鹽水那樣會導致小鼠腦部血液回流受阻,顱內壓暴增,誘發急性腦疝。所以標準做法是全程勻速慢推,控制在20到30秒。」
蔣然如認真的點點頭。
這時,韓野也緊湊了過來,虛心求教道:「學弟,FITC-dextran注射後循環多久灌流?不同分子量的時間不一樣,40kDa怎麼定?」
「30到60分鐘。40kDa介於4kDa和150kDa之間。時間短了滲漏面積不夠,時間長了背景太高。文獻上是30分鐘起,我們可以做到45分鐘。」
韓野點了點頭,在筆記本上寫下要點。
林柔和莊小菲也提了幾個問題,張沐晨都一一解答。
一時間,實驗室所有人都圍在張沐晨身邊。
這時,實驗室的門被推開,李芳然走進來。
一進屋,他就看到實驗台前圍的滿滿當當,自己的兩個碩士生躬著腰做筆記。
李芳然有些奇怪的走上前:「韓野,蔣然。你倆教得怎麼樣了?儀器設備都教明白了吧?」
韓野抬起頭看了張沐晨一眼,又看了一眼李芳然:「老師,學弟不用我們教。反而是學弟在教我們。」
李芳然:?
倒反天罡?
.....